【掌健识】糖化血红蛋白系列微课程7：糖化血红蛋白检测中的干扰因素

大家应该都看过水浒传吧，水浒传里面有一条好汉叫黑旋风李逵。是个有特色的好汉，武力值很高，就是有点傻乎乎。李逵在江湖上有了名号就出了麻烦，碰到了仿冒者李鬼。长得有点像，办的事不一样，极大的损害了李逵同志的江湖生望，大家对李逵同志开始也不信任了。

现在糖化血红蛋白也遇到了一样的麻烦，他也遇到了李鬼的影响。这个李鬼就是糖化血红蛋白检测过程中遇到的种种干扰。那问题是，糖化血红蛋白检测过程中究竟有哪些李鬼，怎么才能识别并解决这些干扰。

先概述一下：①血红蛋白的结构变异和化学衍生物是最为重要的一类干扰来源。目前已经报道了700多个特征性的血红蛋白变异。大多数是由alpha、beta、gamma链的点突变引起的。对gHb的广泛测量已经发现了新的变异，其中许多没有产生表型异常。这个比例大概是1%左右。除了基因变异外，血红蛋白的测量也会受到血红蛋白化学修饰的影响，而血红蛋白的化学修饰可能在糖尿病患者中长期存在。这些修改可能在物理和化学上模拟gHb，导致gHb测定不准确，特别是在使用基于电荷差的分离方法时。氨基甲酰化血红蛋白在尿毒症患者中增加，高浓度的乙酰化血红蛋白发生在b-珠蛋白链NH2末端的罕见突变，可促进体内乙酰血红蛋白的形成。许多血红蛋白疾病，包括镰状细胞病、纯合子HbC病、HbSC病和b-地中海贫血，常常表现出少量Hb种类的增加，即HbA2和HbF，这会干扰某些gHb方法。

②当然除了以上这些血红蛋白的结构变异和化学衍生物外影响红细胞半衰期的病理条件，包括溶血、出血、缺铁性贫血或红细胞输血都会影响gHb值。

下面我简单展开一下，讲两个比较常见的干扰类型：一个是HbF。出生时，血红蛋白占所有血红蛋白的70%，到6个月大时降至5%（47）。遗传性HbF持续存在的个体可能有高达总血红蛋白0%的浓度， b-地中海贫血和镰状细胞患者的浓度通常在总Hb的2%到20%之间。妊娠期也会有轻微的增加。有文献调查显示住院的间期医疗中心HbF。2%的患者高达12%。一般来讲HbF浓度占总Hb的5%的时候，对大多数gHb方法没有显著影响。 大多数阳离子交换色谱技术将HbF和gHbF从HbA和HbA1c中分离出来，从而可以精确测定HbA1c。a2g2四聚体中的g链与HbA的b链只共享前10个氨基酸中的4个，与gHb分析中使用的大多数抗体几乎没有免疫反应性。但是，如果免疫分析结果与总样本相关，则计算结果会错误地降低HbA1c值。

另一个是氨甲酰血红蛋白。尿素在体内自发解离形成氨和氰酸盐。氰酸盐和蛋白质发生反应，形成氨基甲酰。Hb-b链的N-末端缬氨酸与异氰酸反应，会稳定形成氨甲酰Hb。先前的研究表明，1mmol/L尿素可以在体内产生0.063%氨基甲酰血红蛋白。尿毒症患者的氨基甲酰血红蛋白浓度可能高达总血红蛋白的3%。此外，临床医生应注意尿毒症患者中影响红细胞更新的其他因素，如血液透析患者红细胞寿命缩短，进而影响gHb读数的准确性。氨基甲酰Hb具有与HbA1c相似的等电点，因此会干扰基于电荷的gHb测量方法。在体外实验中，氨基甲酰化的血红蛋白会干扰多种阳离子交换方法（包括Bio-Rad）中。体外实验显示免疫分析和硼酸盐亲和力不受尿毒症患者中遇到的氨基甲酰血红蛋白浓度的影响。从以上两个案例可以看出，不同检测方法糖化血红蛋白分析收到的干扰类型及程度存在差异。使用不同检测方法对糖化血红蛋白进行检测可以有效的识别并防止干扰。如前所说，血红蛋白的结构变异和化学衍生物是最为重要的一类干扰来源，超过700类的血红蛋白变异体影响着糖化血红蛋白的检测。这一部分内容，将由下一位讲者老师来进行详细介绍。

谢谢大家,那么期待大家下次再见。