【掌健识】糖化血红蛋白系列微课程17：糖化血红蛋白检测的认可要求

早在2010年，欧洲糖尿病研究学会就已经提出：糖化血红蛋白是长期血糖控制的金标准，2017年，《中国2型糖尿病指南》中指出，糖化血红蛋白是长期控制血糖最重要的评估指标，也是指导临床治疗方案调整的重要依据，通常平均每2~3个月需检测一次。因此，糖化血红蛋白检测在糖尿病的诊疗过程中具有不可替代的作用。

在ISO 15189中，没有专门针对糖化血红蛋白检测的指南性文件，因此，对该项目的认可要求，可以主要参照行业标准《WS_T 461-2015 糖化血红蛋白检测》。

在讲认可要求之前，先明确一下分析系统的概念，包括仪器、试剂及校准物。

HbA 1c 是糖化血红蛋白的主要组成成分,占总糖化血红蛋白( glycatedHemoglobin , GHb )的 60% ,目前临床定量测定及应用的是 HbA 1c 结果。

溯源性：

首先确认分析系统的测定结果可溯源至 IFCC 参考方法（测定 HbA 1c 国际公认的参考方法为 IFCC 推荐的高效液相色谱串联电喷雾电离一级质谱或高效液相色谱串联毛细管电泳，两种方法结果一致。）

性能验证报告：

• 实验室在准备使用一个新的分析系统测定临床样品前,应对系统性能进行验证。

• 使用经过NGSP认证的分析系统,可以只验证精密度和正确度。

• 使用未经NGSP认证的封闭系统或开放系统,应对分析系统性能进行充分验证,性能指标除精密度和正确度外,还应包括干扰因素、测量范围等。

• 不宜使用组合系统。

精密度的要求：

• 室内变异系数(CV )小于 3% ,以小于 2% 为宜。

• 注 1 :目前许多测定方法的室内 CV 小于 2% 。

• 注 2 :只有控制室内 CV 小于 2% ,才能实现室间 CV 小于 3.5% 。

• 注 3 : HbA 1c 测定质量目标:小于 0.5% HbA 1c 。

精密度实验方法

分别采用不少于两个水平的质控物或样品(高、低值),每天测定两次(两次时间间隔不少于两小时),每次重复测两个结果,测定 20 个工作日,以 20 个工作日的 80 个结果计算平均值、标准差及变异系数。

 正确度的要求：

与可接受参考值的差值在 ±0.5% HbA 1c 范围内,以控制在 ±0. 3% HbA 1c 范围内为宜。

正确度验证方法,包括但不限于以下方式:

• 参加室间质量评价(能力验证)计划;

• 采用适当的有证标准物质;

• 与运行经过认证分析系统的有资质实验室的测定结果进行比对。

只有无法得到验证实验方法的其他替代材料或过程时,才宜使用厂商产品校准物或正确度控制物。

1、干扰因素

糖化血红蛋白是红细胞中血红蛋白与葡萄糖的结合产物,因此,任何引起血红蛋白数量与质量变化的因素都会干扰 HbA 1c 测定,对结果产生影响。

干扰因素包括: 1）方法学特异的干扰因素，如血红蛋白病、衍生血红蛋白、红细胞生存周期的异常及药物等；2）非方法学特异的干扰因素，具体的因素及干扰程度取决于所采用的测定方法。

实验室应知晓 HbA 1c 测定存在的干扰因素,某些患者人群可能需要用某种特异的 HbA 1c 测定方法或不适宜采用 HbA 1c 来反映体内平均血糖水平。

2、 编写标准操作规程

• 实验室应制定标准操作程序,至少包括以下内容:

• 项目名称;

• 方法学原理;

• 样本(采血管/抗凝剂、储存);

• 校准程序(校准日期间隔、校准方、校准方法);

• 室内质量控制程序(参见附录 C );

• 样品的测定程序;

• 干扰因素;

• 参考区间(范围);

• 试剂;

• 色谱柱(可测定样品数量,适用于使用色谱柱的方法);

• 维护程序。

3、 操作人员的培训、考核、评估以及授权记录、

4、 日常操作记录

• 所用试剂、耗材应按规定存放,在有效期内使用。

• 按SOP要求进行每日质控，并保存记录，如遇失控，应立即查找原因，纠正后方可发布报告。

• 按SOP要求进行定标，并保存记录。

• 所用色谱柱达到检测数量限应及时更换(适用时)。

5、仪器的维护、保养

• 仪器定期校准，每年至少一次，由有资质的工程师执行，并出具校准报告。

• 日常的维护记录，如滤芯、层析柱更换等记录。

今天的分享就到这里，我们下次再见！